简明高效的外环境水军团菌检验技术

前言
军团菌的监测检验工作一直是昂贵、烦琐、低效的事。
为了使其变得简易、轻松、高效，我们需要解决三个问题。
军团菌检验的三个问题
1.简明有效的检验程序的建立。
2.(保证质量和价格合理的)成套军团菌检验产品的稳定供应。
3.(高质量、高效率和价格合理的)膜法过滤器的解决。
简明高效的外环境水军团菌培养分离程序简介：
采样：300ml（空调水）；1-5L（饮用水）
实际通过滤膜的水量：空调水300毫升；饮用管道水1000毫升。
浓缩：用合格的滤器（最好用负压三头滤器）过滤后剪碎滤膜。加入３毫升原水，放振荡器上30秒．
酸处理：１毫升上述过滤水＋１毫升已标定酸，混匀后作用５分钟．然后从中取0.1毫升接种GVPC琼脂平板（在平板1/3处推干后，在另2/3处划线分离）。
培养：将GVPC琼脂平板放置于CO2培养箱或烛缸中''36℃培养4～6天。
筛选：挑取可疑（灰蓝色光滑闪亮）菌落，同时点种GVPC琼脂平板和血琼脂平板（每个平板可点种10-20个菌落）。36℃培养2～4天，保留血平板完全不生长而GVPC平板生长良好的菌。
初步鉴定：
o菌落形态像。
o血琼脂完全不生长。
oG(-)小杆菌
注意：
1. 从同一标本中分离多种军团菌：
每个平板可挑取3～5个菌落，做玻片军团菌血清分型（约有1/4左右的空调水标本中可能分离出两种血清型以上的军团菌''而为此必须使用能够对各个军团菌型别特别是嗜肺军团菌1-8型单独型别分型的军团菌分型血清.）。
2. 定量报告(必须使用本操作程序和我们标定的酸处理液)：
使用标定过的酸液作酸处理，可根据军团菌菌落数和简单公式，作出标本中军团菌数的定量报告(每毫升水中军团菌活菌数)。
公式1：每毫升水中军团菌活菌数 = 平板上军团菌菌落数÷2.5(当滤膜过滤的标本水量固定为300毫升时''适用于此公式）。
公式2：每毫升水中军团菌活菌数 = 平板上军团菌菌落数÷(X÷120) (当滤膜过滤的标本水量不固定时''适用于此公式）。
注: X = 公式2中实际经过滤膜的水样毫升数。
3. 避开钠离子:
钠离子对军团菌的生长有显著的抑制作用.因此在整个检验过程中''必须避免使用含钠离子的试剂如生理盐水(可用蒸馏水代替)。